鈣離子探針

Ca2+作為細胞內(nèi)的第二信使，調(diào)控著許多重要的生理活動。在與Ca2+結(jié)合條件下，熒光探針顯現(xiàn)出光譜響應；這使研究者可以通過利用熒光顯微鏡、流式細胞儀、熒光分光鏡和熒光分光儀等來研究細胞內(nèi)部游離的Ca2+濃度的變化。而Fluo-3結(jié)合鈣離子后的吸收波長為506nm，發(fā)射波長為526nm（綠色）。因為常被用488型激光發(fā)生器激發(fā)，激發(fā)波的長波長降低了背景的干擾，因此是使用廣泛的熒光探針之一。

Fluo-3的保存和溶解：

1）收到貨后，應置于-20℃保存。

2）推薦用DMSO溶解探針，溶解前應將DMSO 和Fluo3均在室溫平衡。溶解過程較慢，請保持足夠的溶解時間。如果要長期保存，請用無水DMSO溶解，溶解后的儲液密封置于-20℃保存。同樣儲液在每次開蓋前都要置于室溫平衡，以避免水汽凝結(jié)在長期保存中，造成探針水解。一般推薦的儲液濃度為1-5mM，工作液濃度一般為：1-5 µM。為了防止出現(xiàn)較高背景及非特異性染色，探針的終濃度要盡可能低。

3）公司在每次發(fā)貨時，都給客戶提供免費的F-127助溶劑，用于探針溶解。如果用純的DMSO長時間溶解不了，請配制20%的F127 DMSO溶液，加速溶解。

Fluo-3和Fura-2的區(qū)別：

Fluo-3和Fura-2相比，其優(yōu)點是：一方面可以被氬離子激光（argon-ion laser）的488nm激發(fā)光激發(fā)，便于檢測；另一方面，Fluo-3和鈣離子結(jié)合后熒光變化更強，即對鈣離子濃度變化的檢測更加靈敏；同時，Fluo-3和鈣離子的結(jié)合能力較弱，這樣可以比Fura-2檢測到細胞內(nèi)更高濃度的鈣離子水平；此外，對于細胞內(nèi)的鈣離子的即時變化反應得更加準確，減小了因為和鈣離子解離速度慢而導致的熒光變化滯后。Fluo-3廣泛地用于流式細胞術和激光共聚焦顯微掃描中。

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